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脂肪是食品的主要成分之一,常用的測(cè)定方法有:索氏提取法、酸水解法、三氯甲烷冷浸法、羅茲-哥特里法、蓋勃法、巴布科氏法和尼霍夫氏堿法等。其中索氏提取是*的經(jīng)典方法,也是我國(guó)糧油分析的標(biāo)準(zhǔn)方法。
索氏提取法,又名連續(xù)提取法、索氏抽提法,是從固體物質(zhì)中萃取化合物的一種方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的測(cè)定。
操作方法:
①濾紙筒的制備:將濾紙裁成8cm×15cm大小,以直徑為2.0cm的大試管為模型,將濾紙緊靠試管壁卷成圓筒型,把底端封口,內(nèi)放一小片脫脂棉,用白細(xì)線扎好定型,在100~105℃烘箱中烘至恒重(準(zhǔn)確至0.0002g)。
②樣品制備:將樣品置于100~105℃烘箱中烘干并磨碎(或用測(cè)定水分后的試樣),準(zhǔn)確稱取2~5試樣置于濾紙筒內(nèi),封好上口。
③索氏抽提器的準(zhǔn)備:索氏抽提器是由回流冷凝管、提脂管、提脂燒瓶三部分所組成,提取脂肪之前應(yīng)將各部分洗滌干凈并干燥,提脂燒瓶需烘干并稱至恒重。
④抽提:將裝有試樣的濾紙筒放入帶有虹吸管的提脂管中 ,倒入乙醚,滿至使虹吸管發(fā)生虹吸作用,乙醚全部流入提脂瓶,再倒入乙醚,同樣再虹吸一次。此時(shí),提脂燒瓶中乙醚量約為燒瓶體積的2/3.接上回流冷凝器,在恒溫水浴中抽提,控制速度約為80滴/min(夏天約控制為45℃,冬天約控制為50℃),抽提3~4h至抽提*(時(shí)間視含油量高低而定,或8~12h,甚至24h)。抽提是否*可用濾紙或毛玻璃檢查,由提脂管下口滴下的乙醚滴在濾紙或毛玻璃上,揮發(fā)后不留下痕跡表示抽取*。
⑤回收溶劑:取出濾紙筒,用抽提器回收乙醚,當(dāng)乙醚在提脂管內(nèi)即將虹吸時(shí)立即取下提脂管,將其下口放到盛有乙醚的試劑瓶口處,使之傾斜,使液面超過(guò)虹吸管,乙醚即經(jīng)虹吸管流入瓶?jī)?nèi)。按同法繼續(xù)回收將乙醚*蒸出后,取下提脂燒瓶,于水浴上蒸去殘留乙醚。用紗布擦凈燒瓶外部,于100~105℃烘箱中烘至恒重并準(zhǔn)確稱量(或?qū)V紙筒置于小燒杯內(nèi),揮干乙醚,在100~105℃烘箱中烘至恒重,濾紙筒及樣品所減少的質(zhì)量即為脂肪的質(zhì)量。所用濾紙應(yīng)事先用乙醚浸泡揮干處理,濾紙筒應(yīng)預(yù)先恒量)。